PF-Tek för latmaskar

för kultivering av spannmålsälskande svampar
(Psilocybe cubensis)
( uppdaterad: February 03, 2021, at 01:54 AM )
översatt: pinback (at) ziplip (dot) com
kommentarer och förbättringar är alltid välkomna (på engelska)

Material

Substrat

Sterilisation

Inohulation

Inkubation

Fruktbildning

Vermikulit görs av ett naturligt förekommande mineral - mica.
Krossad mica innehållandes vatten värms, och expanderar då till flera gånger dess ursprungsvolym.
Vermikulit kan hålla flera gånger sin egen vikt i vatten och ger substratet en luftig struktur.
Vermikulit är tillgängligt i flera grovhetsgrader, där medel och medelfin passar bäst för svampkultivering.

BRF går att köpa i hälsokostaffärer, antingen redan malet, eller så finns det bara som helt råris.
I så fall kan du fråga om du kan mala det i affären, eller om det inte är möjligt, mala det i en elektrisk kaffekvarn.
BRF bör förvaras svalt och torrt under längre perioder, eftersom det annars kan härskna på grund av dess fetthalt.
Om det inte går att få tag på BRF går det att använda grahamsmjöl eller rågmjöl med liknande resultat.
Google

En plastspruta med fastsatt nål som innehåller 10ml - 12ml (1 ml = 1 cc) vatten med svampsporer.
Färgen kan variera från att vara helt genomskinlig till svagt violett, beroende på mängden sporer i vattnet.
Sporerna är mikroskopiska, så så länge du ser ett par prickar i det mer eller mindre klara vattnet finns det mer än nog med sporer.

Tillgängliga via internet från, till exempel,

www.sporeworks.com
www.thehawkseye.com
och många fler.

Burkarna ska rymma ~240 ml.
Man kan använda antingen insyltningsburkar (Ball, Kerr...) eller dricksglas, det enda som krävs är att de är avsmalnande nedåt och "bredhalsade" så kakan kan glida ut i en del när den är färdigkoloniserad.

Till en burk (~240 ml) behövs:

=> 140 ml vermikulit
=> 40 ml rårismjöl
=> lite vermikulit att fylla upp burken med (ca: 20 ml)
=> vatten

Lägg den erfordrade mängden vermikulit för alla burkar i en laddning (till exempel 6 burkar: 6 x 140 ml = 840 ml) i en skål.

Häll sakta vatten över vermikuliten under omrörning.
Var försiktigt så inte mer vatten än vad som kan absorberas av vermikuliten tillsätts.

När du lutar skålen ska du se en liten mängd vatten som rinner ned från vermikuliten.
Detta inträffar då den korrekta vattenmängden är uppnådd.

Blanda nu i all BRF (till exempel: 6 x 40 ml = 240 ml) i den våta vermikuliten och rör om med en sked. Målet är att täcka de våta vermikulitpartiklarna med ett lager BRF.

Fyll burkarna med blandningen till 1 cm från toppen. Det är väldigt viktigt att fylla burkarna med substratet utan att packa det. Det ska vara väldigt luftigt och löst för att ge mycelet optimala förhållanden.
Var noga med att inte lämna något substrat på den övre kanten av burken. Om du inte var tillräckligt noggrann och det är substratfläckar på kanten, så ta en ren, torr trasa och torka rent. Annars kan kontaminanter angripa dessa fläckar och på så sätt arbeta sig ner i burken.

Fyll burken med torr vermikulit till toppen.
Detta lager förhindrar luftburna kontaminanter från att nå det underliggande substratet utifall att sådana skulle komma in under inokulationen.

Ta en 12 cm bred remsa av aluminiumfolie och vik den på mitten.
Vik folien över burkens öppning som det visas på bilderna.
Om du använder burkar med metallock kan du slå fyra hål i ytterkanten av locket med en liten spik och en hammare och skruva på locket. Hålen ska vara något större än diametern på sprutans nål

Vik upp foliekanterna och tryck ihop dem så du får ett fint aluminiumfolielock.

Ta en bit folie som mäter 12 x 12 cm och vik det över de två första lagren (eller metallocket om du använder lock) utan att vika upp kanterna eftersom foliebiten ska tas loss under inokulationen.
Nu har du tre lager folie över öppningen, där bara det översta lagret lyfts upp under inokulationen.

Häll ca: 2.5 cm vatten i tryckkokaren; använd inte för mycket vatten då det kan komma in i burkarna och ändra vattenhalten.
Ställ sedan burkarna i tryckkokaren. Användandet av en ställning för att förhindra att burkarna står i direktkontakt med tryckkokarens botten rekommenderas starkt.
Sätt på locket och höj trycket till 15 psi (= 1 atm övertryck) under 15 minuter på medelhög värme.
Om du värmer tryckkokaren för hastigt kan detta få burkarna att spricka.
Sänk temperaturen så snart det kommer ånga från vikten eller ventilen så att ångflödet blir minimalt. Tryckkoka i 45 minuter från då detta sker.

Ta ut burkarna då tryckkokaren har svalnat till rumstemperatur, och placera dem på en ren yta. Ha en alkoholbrännare eller tändare samt sporsprutan redo. Skaka sporsprutan för att bryta upp sporklumparna i den.

För att det ska vara möjligt att skaka den måste det finnas en liten luftbubbla i sprutan. Om det inte finns det går det att suga in ca: 1 ml steril luft i sprutan genom att placera nålspetsen i flamman och långsamt dra ut kolven.

Lösgör folien från alla burkar så att den lätt kan lyftas när du ska inokulera.

Ta skyddet från nålen och glödga nålen över flamman. Låt den svalna under några sekunder.

Ta loss det övre folielagret och lägg det uppochned bredvid burken.

Stick hål på folien vid kanten av burken med nålen, för ner den ca: 2.5 cm och injicera sporvattnet i riktning mot kanten. Du ska nu se en liten droppe som rinner ned längs insidan av burken mot botten. Varje burk inokuleras på fyra ställen med lika långt avstånd från varandra. Du bör använda 1 - 1.5 ml av sporvattnet per burk, så en 10ml-spruta räcker till 6 - 10 burkar.

Sätt tillbaka folien. Flamsterilisera nålen efter varannan burk för att förhindra att kontaminanter sprider sig utifall att en burk inte blev ordentligt steriliserad.
Då alla burkar är färdiginokulerade ska du vika upp foliekanterna och trycka ihop dem så det blir ett fint aluminiumfolielock. Skriv inokulationsdatum och art/stam (strain = stam) på folien med en allmärkpenna. Om du skulle råka röra något annat än den inre folien med nålen när du inokulerar så flamsterilisera omedelbart nålen igen.

Tillväxten i de inokulerade burkarna blir högre om de förvaras i 27°C.

Enligt Stamets är den optimala inkubationstemperaturen för P. cubensis 30°C, men eftersom burkarna är några grader varmare än omgivningen (mycel avger värme då det växer) är 27°C en bra och säker inkubationstemperatur.

Man kan bygga en effektiv inkubator av två plastlådor av samma storlek och en akvarievärmare.
Det finns flera sorters olika akvarievärmare. När du köper en, se till att det är en som är "fullständigt nedsänkbar".
Sätt fast värmaren på bottnen av den första lådan och häll i 27-gradigt vatten så värmaren täcks helt.
Justera termostaten på värmaren så den stänger av sig vid precis 27°C.
Lägg några klotsar eller liknande på botten av lådan, dessa ska höja upp den andra lådan och se till så den inte kommer i kontakt med värmaren. I bilden ovanför används fyra burkar. Det går även att använda tegelstenar, stenar eller något liknande.

Put the second box in the one containing water.
After a few hours measure the temperature again and adjust the heater if necessary so the water temperature is 27°C.

När lådan är tom kommer den att flyta på vattnet.
Vattennivån i den undre lådan ska nå ungefär 2/3 av sin höjd då den övre lådan är lastad med burkar och vilar på klotsarna.

Nu kan du lägga inokulerade burkar i lådan.

Täck burkarna med en filt för att förhindra att värmen smiter ut och för att hålla det mörkt i lådan.

Obs: vattennivån sjunker efter några veckor på grund av avdunstningen. Därför måste man fylla på med nytt vatten då och då för att hålla vattennivån hög nog.
Låt det aldrig avdunsta så mycket vatten att värmaren inte är fullständigt täckt av vatten!

Förutsatt att burkarna hålls varma bör du se de första tecknen på tillväxt efter 3-5 dagar som klarvita prickar. Detta är mycel. Om något annat växer som inte är vitt, t.ex. grönt, svart eller lila, så är burkarna kontaminerade och deras innehåll måste slängas och dina rengöringsförfaranden förbättras. Efter att burken tömts och diskats med diskmedel och varmt vatten kan den återanvändas.

Check the Shroomery Contamination FAQ for more information on possible contaminations in mushroom culture.

Beroende på temperatur tar det 14-25 dagar för mycelet att fullständigt kolonisera substratet. Förvara sedan burkarna i rumstemperatur, runt 21°C.
Ställ inte burkarna i direkt solljus; indirekt solljus eller en svag lampa under några få timmar per dag räcker.

Inom 5-10 dagar (med vissa svampstammar kan det ta upp till 30 dagar) kommer mycelförtjockningar av knappnålshuvudstorlek att formas. Dessa s.k. "pins" representerar början av fruktkroppens växt. De följande dagarna kommer små svampar med brun topp bli synliga. Det är nu dags att "föda" (birth:a) kakan och ställa den i fruktbildningsbehållaren där svamparna kan växa fullt ut.
Vissa svammar har svårt för att bilda pins. Lägg i så fall den koloniserade burken i en plastpåse och ställ den i kylskåpet över natten, och föd den nästa dag, även om den inte har några pins. Köldchocken fungerar vanligtvis som en signal för att påbörja pinning.

Fruktbildningen kan ske i vilken behållare som helst som kan förslutas och som har minst en genomskinlig sida, helst ovansidan. Lämpliga behållare är plasthinkar, papperskorgar, terrarium, akvarium...
Lägg ett 1.5 cm tunt lager fuktad perlit eller leca-kulor eller rent utav en våt pappershandduk på botten av behållaren, och föd kakorna ovanpå detta lager genom att låta dem glida ned uppochned från burkarna.

Ibland glider inte kakan ut ur burken av sig själv.
Tag då helt enkelt burken uppochned i din hand och ge den ett lätt slag med din andra hands handflata. Detta får kakan att glida loss mot locket, och den kan sedan lätt födas.

Avståndet mellan kakorna i fruktbildningsbehållaren bör vara minst 5 cm. Lägg ett lager genomskinlig plast över öppningen. Ta av detta lager en gång om dagen och fläkta ut luften i behållaren med en bit kartong. Om bottenlagret börjar torka ut så spraya det med lite vatten för att hålla det fuktigt, eftersom detta lager förser luften med fukt. Spraya inte direkt på kakorna.
Vidrör kakorna så lite som möjligt, men om du gör det så se till att tvätta händerna noga innan.
De små svamparna växer sig stora inom några dagar, och så snart hattarna börjar öppna sig kan de skördas.
Denna samtidiga mognad av fruktkropparna kallas "flush"

Då svamparna vuxit sig stora finns det vanligtvis några små, outvecklade kvar som man brukar kalla "aborts". De går att känna igen på sina mörka/svarta hattar och att de slutat växa. De går dock bra att använda förutsatt att de inte ruttnat.

Efter ungefär en vecka börjar nya små svampar att bildas och mogna.
Detta kan upprepas upp till fyra gånger, och ibland fler ändå. Efter det har näringen i kakan tagit slut och den slutar att producera svamp.
They can be also used to start outdoor beds.

Ibland attackerar grönmögel kakan innan näringen tagit slut. Släng omedelbart de kontaminerade kakorna ifall detta skulle hända för att förhindra att möglet sprider sig.

Tredje flushen:

Fjärde och sista flushen: